做流式的这些年（1）
一：实验原理：
流式细胞仪：仅分析时，通过物理性检测样本的颗粒大小，是否携带荧光，进一步分析检测样本的性质。如果是分选，其工作原理就是接着上面的，再利用电场磁场，根据分析的样本的物理性质（颗粒大小，是否携带荧光）不同，导电后，使其在磁场里获得不同的偏移，再进行收取（自己理解的原理）。
具体细节：散射光信号与荧光信号不同的捕捉。
（1）散射光信号:SSC和FSC，这俩兄弟是检测粒子是否拥有完美的“皮肤和身材”的。
SSC:侧向散射光。激光打到检测粒子上后，测面得到的阴影大小，粒子表面“坑坑越多，起伏越大”，该值就越大。
FSC:前向散射光。激光打到检测粒子上后，正面得到的阴影大小，粒子最大切面最大，该值就越大。
（2）荧光信号：自发荧光和特异荧光。这几个姐妹是评判粒子拥有多少奢侈品的（一般通过检测FITC、PI、APC......等等发射光的信号）。
自发荧光：粒子自己拥有高度活跃的能量，当粒子通过机器时，被机器的激光激发，发射出荧光信号（或者自己就发射射线）。这个一般我们可以预实验时，做一个空白对照组，检测是否有自发荧光，若有，且和我们的特异荧光发射光谱不重叠，就忽略，但是如果光谱有重叠，那就每次实验时，留一个空白对照，把自发荧光扣掉~
特异荧光：人工给粒子结合一个或多个带有荧光素的抗体，当粒子通过机器时，被机器的激光激发，发射出荧光信号。
检测一个因素，选择一个该因素常用的荧光素标记，一般机器都有检测FITC、PI、APC的通道。
同时检测多个因素，需要合理安排实验：要尽量选择发射光谱不重叠，或重叠尽量小的荧光素标记，后期再通过调节荧光补偿尽量分离。
这里提醒一下：特异性荧光实验时，最好购买内
实验原理就是，仪器通过接收到的不同光信号，分析检测粒子大小，荧光信号。
#生信分析##生物信息学##医学生medic[超话]##流式细胞#
节选自丁香园：三七大黄
一：实验原理：
流式细胞仪：仅分析时，通过物理性检测样本的颗粒大小，是否携带荧光，进一步分析检测样本的性质。如果是分选，其工作原理就是接着上面的，再利用电场磁场，根据分析的样本的物理性质（颗粒大小，是否携带荧光）不同，导电后，使其在磁场里获得不同的偏移，再进行收取（自己理解的原理）。
具体细节：散射光信号与荧光信号不同的捕捉。
（1）散射光信号:SSC和FSC，这俩兄弟是检测粒子是否拥有完美的“皮肤和身材”的。
SSC:侧向散射光。激光打到检测粒子上后，测面得到的阴影大小，粒子表面“坑坑越多，起伏越大”，该值就越大。
FSC:前向散射光。激光打到检测粒子上后，正面得到的阴影大小，粒子最大切面最大，该值就越大。
（2）荧光信号：自发荧光和特异荧光。这几个姐妹是评判粒子拥有多少奢侈品的（一般通过检测FITC、PI、APC......等等发射光的信号）。
自发荧光：粒子自己拥有高度活跃的能量，当粒子通过机器时，被机器的激光激发，发射出荧光信号（或者自己就发射射线）。这个一般我们可以预实验时，做一个空白对照组，检测是否有自发荧光，若有，且和我们的特异荧光发射光谱不重叠，就忽略，但是如果光谱有重叠，那就每次实验时，留一个空白对照，把自发荧光扣掉~
特异荧光：人工给粒子结合一个或多个带有荧光素的抗体，当粒子通过机器时，被机器的激光激发，发射出荧光信号。
检测一个因素，选择一个该因素常用的荧光素标记，一般机器都有检测FITC、PI、APC的通道。
同时检测多个因素，需要合理安排实验：要尽量选择发射光谱不重叠，或重叠尽量小的荧光素标记，后期再通过调节荧光补偿尽量分离。
这里提醒一下：特异性荧光实验时，最好购买内
实验原理就是，仪器通过接收到的不同光信号，分析检测粒子大小，荧光信号。
#生信分析##生物信息学##医学生medic[超话]##流式细胞#
节选自丁香园：三七大黄
还以为是反卫星侦查设施，原来是自然现象[裂开][允悲]
【#俄一地区上空现神奇光晕#】俄罗斯别尔哥罗德州上空现罕见自然现象，专家解释称是“光晕”。
别尔哥罗德大学研究职能部负责人娜塔莉亚·安德烈耶娃在接受俄新社采访时解释道： “我们这里最近下过雨，大气层比较潮湿，所以此时大气层中存在一定大小的颗粒，它们可以会以某种形式结晶。当光穿过这些粒子时，就会形成这种现象。#俄乌战争速报##俄乌战争# https://t.cn/EyPFKKk
【#俄一地区上空现神奇光晕#】俄罗斯别尔哥罗德州上空现罕见自然现象，专家解释称是“光晕”。
别尔哥罗德大学研究职能部负责人娜塔莉亚·安德烈耶娃在接受俄新社采访时解释道： “我们这里最近下过雨，大气层比较潮湿，所以此时大气层中存在一定大小的颗粒，它们可以会以某种形式结晶。当光穿过这些粒子时，就会形成这种现象。#俄乌战争速报##俄乌战争# https://t.cn/EyPFKKk
自动显微镜法粒度(药典0982)分析仪用于透皮膏药粒度检测
应用背景
透皮膏药是皮肤给药系统的一种制剂，通常用以在皮肤表面给药，药物以恒定速率透过皮肤表面进入循环系统，经皮制剂既可以起局部治疗作用也可以起全身治疗作用。
图1：人体皮肤示意图[1]
研究发现，膏剂中的乳粒粒径可以显著影响其细胞摄取的速率，透皮膏药中适当的粒径分布可以提高透皮膏药的延展性，并优化人体对药物的吸收[2]。
粒度检测方法
中国药典2020版《0109软膏剂 乳膏剂》章节中指出，粒度检测是这类制剂的必检项目，如何进行该项检查，药典中也作出了明确规定，应当采用通则《0982粒度和粒度分布测定方法》中第一法（显微镜法）进行测定。
测试流程
样品描述：粘稠膏状
制样方法：取样品置于载玻片上，加入适量甘油进行稀释，用另外一片盖玻片覆盖在药品上面，轻轻压合，使颗粒分布均匀，置于YH-MIP系列显微计数法不溶性微粒分析仪镜头下，进行拍摄观察。
测试过程：在镜头的50~100倍率下检查盖玻片的全部视野，此时应无凝聚现象，不得检出50微米以上的粒子；随后在200~500的放大倍率下检测该视野下的颗粒总数及规定尺寸的颗粒数，并通过软件计算不同尺寸占比百分数。
检测结果：
图3：（a）局部颗粒视野图；（b）样品的粒度分析
测试结果包括两个部分：粒子的真实图片和粒度分析系统结构汇总分析。颗粒的真实图片可以直观的了解到粒子的分散情况，可以为试剂的工艺开发提供一定的指导作用；粒度分析系统结构汇总分析则给出了样品中的不同粒径范围的粒子数、D10、D50、D90等信息，也包含最大/最小粒径、平均经等信息。通过测试结果与历史数据的对比，可以获得不同批次之间样品的差异性，有利于研究者作出判断与辨别。
结论：1. 该药物膏剂中未检出超过50μm粒径的颗粒。
2. 测试结果直接呈现出D10、D50、D90等结果。
3. 82%的颗粒粒径小于10μm，少量的大颗粒存在。
4. 采用超景深功能，获得高清颗粒图片，粒径计算结果更精确。
测试仪器：YH-MIP 系列显微镜法粒度仪
技术优势
√ 全视野自动扫描，操作简单，节约时间；
√ 全自动颗粒计数，保护眼睛，减少人为操作误差；
√ 符合各国药典/ 国标法规，一键自动出具对应报告；
√ 符合21CFR Part11 及GMP 对数据完整性的要求。
胤煌科技(YinHuang Technology)是一家专注于为医药、半导体及化工材料等行业提供检测分析设备及技术服务的高科技公司，致力于为客户提供全面、准确的检测分析和解决方案。主营产品包括不溶性微粒分析仪，可见异物检查分析仪，原液粒度及Zeta电位分析仪，CHDF高精度纳米粒度仪，高分辨纳米粒度仪，溶液颜色测定仪，澄清度测定仪等，公司自主研发的YH-MIP系列显微计数法不溶性微粒仪、YH-FIPS系列流式动态图像法粒度仪，YH-FIPS系列微流成像颗粒分析仪已经在生物医药、半导体及材料化工领域得到广泛应用。
[1] Hyunjae Lee, et al. Device-assisted transdermal drug delivery. Adv DrugDeliv Rev. 2018 Mar 1;127:35-45.
[2]孙蓉，徐小艺等；效应面法对纳米乳膏的处方优化及其透皮性能研究.海峡药学，2016，28(08),26-29.
应用背景
透皮膏药是皮肤给药系统的一种制剂，通常用以在皮肤表面给药，药物以恒定速率透过皮肤表面进入循环系统，经皮制剂既可以起局部治疗作用也可以起全身治疗作用。
图1：人体皮肤示意图[1]
研究发现，膏剂中的乳粒粒径可以显著影响其细胞摄取的速率，透皮膏药中适当的粒径分布可以提高透皮膏药的延展性，并优化人体对药物的吸收[2]。
粒度检测方法
中国药典2020版《0109软膏剂 乳膏剂》章节中指出，粒度检测是这类制剂的必检项目，如何进行该项检查，药典中也作出了明确规定，应当采用通则《0982粒度和粒度分布测定方法》中第一法（显微镜法）进行测定。
测试流程
样品描述：粘稠膏状
制样方法：取样品置于载玻片上，加入适量甘油进行稀释，用另外一片盖玻片覆盖在药品上面，轻轻压合，使颗粒分布均匀，置于YH-MIP系列显微计数法不溶性微粒分析仪镜头下，进行拍摄观察。
测试过程：在镜头的50~100倍率下检查盖玻片的全部视野，此时应无凝聚现象，不得检出50微米以上的粒子；随后在200~500的放大倍率下检测该视野下的颗粒总数及规定尺寸的颗粒数，并通过软件计算不同尺寸占比百分数。
检测结果：
图3：（a）局部颗粒视野图；（b）样品的粒度分析
测试结果包括两个部分：粒子的真实图片和粒度分析系统结构汇总分析。颗粒的真实图片可以直观的了解到粒子的分散情况，可以为试剂的工艺开发提供一定的指导作用；粒度分析系统结构汇总分析则给出了样品中的不同粒径范围的粒子数、D10、D50、D90等信息，也包含最大/最小粒径、平均经等信息。通过测试结果与历史数据的对比，可以获得不同批次之间样品的差异性，有利于研究者作出判断与辨别。
结论：1. 该药物膏剂中未检出超过50μm粒径的颗粒。
2. 测试结果直接呈现出D10、D50、D90等结果。
3. 82%的颗粒粒径小于10μm，少量的大颗粒存在。
4. 采用超景深功能，获得高清颗粒图片，粒径计算结果更精确。
测试仪器：YH-MIP 系列显微镜法粒度仪
技术优势
√ 全视野自动扫描，操作简单，节约时间；
√ 全自动颗粒计数，保护眼睛，减少人为操作误差；
√ 符合各国药典/ 国标法规，一键自动出具对应报告；
√ 符合21CFR Part11 及GMP 对数据完整性的要求。
胤煌科技(YinHuang Technology)是一家专注于为医药、半导体及化工材料等行业提供检测分析设备及技术服务的高科技公司，致力于为客户提供全面、准确的检测分析和解决方案。主营产品包括不溶性微粒分析仪，可见异物检查分析仪，原液粒度及Zeta电位分析仪，CHDF高精度纳米粒度仪，高分辨纳米粒度仪，溶液颜色测定仪，澄清度测定仪等，公司自主研发的YH-MIP系列显微计数法不溶性微粒仪、YH-FIPS系列流式动态图像法粒度仪，YH-FIPS系列微流成像颗粒分析仪已经在生物医药、半导体及材料化工领域得到广泛应用。
[1] Hyunjae Lee, et al. Device-assisted transdermal drug delivery. Adv DrugDeliv Rev. 2018 Mar 1;127:35-45.
[2]孙蓉，徐小艺等；效应面法对纳米乳膏的处方优化及其透皮性能研究.海峡药学，2016，28(08),26-29.
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